引用本文
朱有森, 李艳红, 宋光鲁. 尿液NMP22、OPN及BTA检测在膀胱尿路上皮癌诊断和预后评估中的价值[J]. 微创泌尿外科杂志, 2020,9(3): 203-207.
ZHU Yousen, LI Yanhong, SONG Guanglu. Value of urine NMP22, OPN and BTA in diagnosis and prognosis of bladder urothelial carcinoma. JOURNAL OF MINIMALLY INVASIVE UROLOGY,2020,9(3): 203-207.  
Doi:10.19558/j.cnki.10-1020/r.2020.03.011
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尿液NMP22、OPN及BTA检测在膀胱尿路上皮癌诊断和预后评估中的价值
朱有森1, 李艳红1, 宋光鲁2
1新疆医科大学第一附属医院检验中心 830054 乌鲁木齐
2新疆医科大学第一附属医院泌尿外科
通信作者：宋光鲁,1093975593@qq.com
收稿日期: 2019-04-24
摘要

目的：探讨尿液核基质蛋白22（NMP22）、骨桥蛋白（OPN）及膀胱肿瘤抗原（BTA）检测在膀胱尿路上皮癌诊断和预后评估中的价值。方法：选取65例膀胱尿路上皮癌患者为观察组,49例泌尿系统良性疾病患者为良性组,45例健康体检者为健康组。检测三组患者尿液NMP22、OPN及BTA水平,并分析其检测结果对膀胱尿路上皮癌的诊断价值,探讨不同临床特征患者NMP22、OPN及BTA阳性率差异,对比不同NMP22、OPN及BTA表达情况患者3年生存情况。结果：观察组患者尿液NMP22、OPN及BTA水平均显著高于良性组和健康组（ P<0.05）。NMP22、OPN及BTA诊断膀胱尿路上皮癌的曲线下面积分别为0.898、0.887、0.878,联合检测的受试者工作特征曲线下面积为0.957,诊断敏感度为92.5%,特异度为87.2%。尿NMP22、OPN及BTA的表达与肿瘤直径、肿瘤数目、病理分级、临床分期、有无淋巴结转移有关（ P<0.05）;而与患者性别、年龄无关（ P>0.05）。NMP22、OPN及BTA表达阳性患者生存率均显著低于阴性患者（ P<0.05）。结论：NMP22、OPN及BTA对膀胱尿路上皮癌的诊断具有潜在价值,其表达情况与临床病理特征以及预后存在相关性。

关键词: 尿路上皮癌; 核基质蛋白22; 骨桥蛋白; 膀胱肿瘤抗原
中图分类号:R737.1 文献标志码:A
Value of urine NMP22, OPN and BTA in diagnosis and prognosis of bladder urothelial carcinoma
ZHU Yousen1, LI Yanhong1, SONG Guanglu2
1Department of Testing Center, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China
2Department of Urology, the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University
Corresponding author： SONG Guanglu, 1093975593@qq.com
Abstract

Objective： To explore the value of urine nuclear matrix protein 22 (NMP22), osteopontin (OPN) and bladder tumor antigen (BTA) in the diagnosis and prognosis of bladder urothelial carcinoma.Methods： Sixty-five patients with bladder urothelial carcinoma were selected as observation group, 49 patients with benign diseases of urinary system as benign group, and 45 healthy subjects as healthy group. The levels of urine NMP22, OPN and BTA in three groups were determined, and the diagnostic value of NMP22, OPN and BTA in bladder urothelial carcinoma was analyzed. The differences in NMP22, OPN and BTA positive rate in patients with different clinical characteristics were investigated, anUrine NMP22, OPN and BTA levels in observation group were significantly higher than those in benign and healthy groups (P < 0.05). The AUC of NMP22, OPN and BTA in the diagnosis of bladder urothelial carcinoma was 0.898, 0.878 and 0.887, respectively. The AUC of combined detection was 0.957, with sensitivity of 92.5% and specificity of 87.2% respectively. The expression levels of NMP22, OPN and BTA in urine were correlated with tumor diameter, tumor number, pathological grade, clinical stage and lymph node metastasis (P < 0.05), and not with gender and age (P > 0.05). The survival rate of patients with positive expression of NMP22, OPN and BTA was significantly lower than that of patients with negative expression (P < 0.05).Conclusion： NMP22, OPN and BTA have potential values in the diagnosis of bladder urothelial carcinoma. The expression levels of NMP22, OPN and BTA are correlated with clinicopathological features and prognosis.

Keyword: urothelial carcinoma; nuclear matrix protein 22; osteopontin; bladder tumor antigen

膀胱癌是一种常见的泌尿系统恶性肿瘤, 具有较高的发病率和死亡率。据统计, 全球每年新发膀胱癌病例约为40万例, 且随着环境污染的日益严重和人口老龄化的加剧, 膀胱癌发生率逐年升高[1, 2]。尿路上皮癌是发生于尿路上皮的恶性肿瘤疾病, 约占膀胱癌的90%[3]。膀胱镜活检是膀胱癌早期诊断和术后跟踪随访的主要方法, 但其具有侵入性, 容易引起尿路感染、出血等并发症, 导致部分患者难以耐受[4]。尿脱落细胞检查虽属于无创操作, 但临床上缺乏客观统一的检测标准, 诊断敏感性较低, 检测结果容易受其他病变干扰。优化膀胱癌诊断方法、提高检测敏感性, 是临床研究的重点[5, 6]。我们研究观察膀胱尿路上皮癌患者尿液核基质蛋白22（nuclear matrix protein, NMP22）、骨桥蛋白（osteopontin, OPN）及膀胱肿瘤抗原（bladder tumor antigen, BTA）的表达情况, 探讨其对尿路上皮癌的诊断价值, 分析尿NMP22、OPN及BTA的表达与患者临床病理特征和预后的关系。

1 资料与方法
1.1 临床资料

收集我院2013年1月– 2016年1月65例初次确诊的膀胱癌患者作为观察组, 其中男44例, 女21例, 年龄42~81岁, 平均（65.23± 7.54）岁。肿瘤数目：单发28例, 多发37例; 病理分级：低级别27例, 高级别38例; 淋巴结转移19例。纳入标准：①病理学检查确诊为膀胱尿路上皮癌; ②接受根治性膀胱切除术治疗; ③临床资料完整, 术前未接受抗肿瘤治疗。排除标准：①合并其他肿瘤以及感染者; ②免疫系统疾病、血液疾病、肝肾功能异常者; ③病理资料不完整, 或不能明确肿瘤分期者; ④随访记录缺失或中途退出者。选取同期49例泌尿系统良性疾病患者为良性组, 男31例, 女18例, 年龄43~79岁, 平均（65.41± 7.13）岁。疾病类型：泌尿系结石25例, 腺性膀胱炎16例, 尿路感染8例。纳入标准：①经临床确诊为泌尿系统相关疾病; ②临床资料完整, 接受相关检查。排除标准：①肿瘤史、泌尿系统手术史患者; ②免疫系统疾病、血液疾病、肝肾功能异常者; ③未留取尿液标本接受检查者。选取同期45例健康体检者为健康组, 男31例, 女14例, 年龄42~79岁, 平均（65.19± 7.16）岁。体检无异常、无其他疾病症状及特征。三组性别、年龄方面比较, 差异无统计学意义（P> 0.05）, 见表1。

表1 三组基础资料比较
1.2 研究方法

1.2.1 观察指标与检测 所有患者于接受膀胱镜检查、留置导尿管等侵入性操作前1周留取晨起首次洁净尿100 mL, 1 000 r/min离心15 min, 取上清检测(r=75mm)。采用酶联免疫法检测尿液中NMP22、OPN及BTA水平, 检测仪器为全自动多功能酶标仪（Flash3001型, 美国Thermo公司）, 配套试剂购于美国Matritech公司, 检测操作严格按试剂盒说明书进行。

1.2.2 随访 观察组患者均行根治性膀胱切除术进行治疗, 术后跟踪随访患者3年内生存情况, 记录患者因癌死亡时间, 随访截止至2019年1月。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行数据统计, 计量资料以 x¯±s描述, 用单因素方差分析或t检验; 计数资料以率（%）描述, 组间用χ 2检验; 绘制受试者工作特征曲线（receiver operating curve, ROC）分析NMP22、OPN及BTA检测对膀胱尿路上皮癌的诊断价值; P< 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果
2.1 各组NMP22、OPN及BTA水平比较

观察组患者尿NMP22、OPN及BTA水平均显著高于良性组和健康组（P< 0.05）; 良性组患者尿NMP22、OPN及BTA水平虽高于健康组, 但差异无统计学意义（P> 0.05）。见表2。

表2 各组尿NMP22、OPN及BTA水平比较 x¯±s
2.2 NMP22、OPN及BTA检测对膀胱尿路上皮癌的诊断价值

NMP22、OPN及BTA诊断膀胱尿路上皮癌的ROC曲线下面积(area under the curve, AUC)分别为0.898、0.887、0.878, 诊断敏感度为75.4%、78.5%、72.3%, 特异度为90.4%、87.2%、89.6%。联合检测的AUC为0.957, 诊断敏感度为92.5%, 特异度为87.2%。见表3, 图1、2。

表3 NMP22、OPN及BTA对膀胱尿路上皮癌的诊断价值

图1 NMP22、OPN及BTA诊断膀胱尿路上皮癌的ROC曲线

图2 联合检测的ROC曲线

2.3 不同临床特征患者NMP22、OPN及BTA阳性率比较

不同年龄、性别患者尿NMP22、OPN及BTA阳性率比较, 差异无统计学意义（P> 0.05）; 但不同肿瘤直径、肿瘤数目、病理分级、临床分期、有无淋巴结转移患者尿NMP22、OPN及BTA比较, 差异有统计学意义（P< 0.05）。见表4。

表4 不同临床特征患者NMP22、OPN及BTA阳性率比较
2.4 NMP22、OPN及BTA的表达与膀胱尿路上皮癌患者3年生存情况的关系

65例患者均获得3年随访, 生存44例, 生存率为67.7%。NMP22阳性49例, 阴性16例, 生存率分别为61.2%（30/49）和87.5%（14/16）, 差异有统计学意义（χ 2=3.983, P=0.046）; OPN阳性47例, 阴性18例, 生存率分别为59.6%（28/47）和88.9%（16/18）, 差异有统计学意义（χ 2=5.063, P=0.024）; BTA阳性51例, 阴性14例, 生存率分别为60.8%（31/51）和97.9%（13/14）, 差异有统计学意义（χ 2=4.767, P=0.029）。NMP22、OPN及BTA表达阳性患者生存率显著低于阴性患者, 差异有统计学意义（P< 0.05）。详见图3。

图3 NMP22、OPN及BTA表达患者3年生存情况

3 讨论

膀胱尿路上皮癌是膀胱癌的主要组织病理学类型, 其恶性程度高、预后差, 组织病理学形态存在多种变异性, 故临床准确诊断对及时采取合理治疗措施和改善预后尤为重要[7]。尿脱落细胞检测具有无创、特异度高的特点, 在膀胱尿路上皮癌诊断方面具有较高应用价值[8]。近年来, 多种肿瘤标记物应用于临床诊断, 但敏感性并未达到预期效果, 且检测结果容易受其他疾病影响, 故选择简单可靠的检测方法来诊断和检测膀胱尿路上皮癌是国内外学者研究的重点方向[9, 10]。

NMP22是一种细胞核结构蛋白, 参与核酸复制、转录等过程, 与细胞增殖活性相关[11]。健康人尿液中NMP22表达量极少, 当膀胱黏膜恶变时, 恶性尿路上皮细胞增殖和凋亡速度加快, NMP22由凋亡细胞核中释放, 以可溶性片段形式脱落于尿液中, 造成尿NMP22水平升高[12]。OPN属于一种磷酸化糖蛋白, 主要有恶性上皮细胞所分泌, 在肺癌、结肠癌等多种肿瘤中均呈高表达状态[13]。有研究发现, OPN能够与CD44变异体和整合素结合, 从而激活多种信号通路, 参与肿瘤的发生、发展过程[14]。BTA又称补体H相关蛋白, 是尿路上皮恶变时水解基底膜产生水解碎片, 这些水解碎片进入膀胱就形成了膀胱肿瘤抗原[15]。有研究表明, BTA对膀胱癌的诊断敏感度高于尿细胞学检测, 尤其对于浅表型、孤立和体积较小的膀胱肿瘤, BTA可能是一种极具潜力的膀胱肿瘤标志物[16]。本研究发现, 观察组患者尿NMP22、OPN及BTA水平均显著高于良性组和健康组, 提示NMP22、OPN及BTA的表达情况与膀胱癌的发生有关, 具有诊断膀胱尿路上皮癌的潜在价值。通过ROC曲线分析发现, NMP22、OPN及BTA诊断膀胱尿路上皮癌的AUC分别为0.898、0.887、0.878, 三者诊断敏感度为75.4%、78.5%、72.3%, 特异度为90.4%、87.2%、89.6%; 提示NMP22、OPN及BTA用于诊断膀胱尿路上皮癌具有一定应用价值; 另外, 在此基础上分析NMP22、OPN及BTA联合检测对尿路上皮癌的诊断价值, 联合检测的AUC为0.957, 且诊断敏感度显著高于各指标单独检测, 说明NMP22、OPN及BTA联合检测能够提高膀胱尿路上皮癌的诊断敏感度, 降低漏诊率。

进一步分析不同临床特征的膀胱尿路上皮癌患者尿NMP22、OPN及BTA表达情况, 结果显示, 不同肿瘤直径、肿瘤数目、病理分级、临床分期以及有无淋巴结转移患者尿NMP22、OPN及BTA表达存在显著差异, 而不同性别、年龄患者尿NMP22、OPN及BTA表达则无明显差异, 提示NMP22、OPN及BTA的表达与肿瘤直径、肿瘤数目、病理分级、临床分期以及有无淋巴结转移有关。对比不同NMP22、OPN及BTA的表达情况患者3年生存情况, 其中NMP22、OPN及BTA表达阳性患者生存率显著低于阴性患者, 提示尿NMP22、OPN及BTA水平可作为膀胱尿路上皮癌患者预后评估的参考依据。

综上所述, 检测尿NMP22、OPN及BTA水平能够为膀胱尿路上皮癌的诊断和评估预后提供有力证据。

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