引用本文
李碧锦, 李军, 凌凯南, 季志强. 双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤复发情况及其与癌组织VEGF、Survivin表达水平的关系[J]. 微创泌尿外科杂志, 2017,6(4): 230-234.
Li Bijin, Li Jun, Ling Kainan, Ji Zhiqiang. Relationship between cancer tissue VEGF and Survivin expression with the recurrence of elderly patientswith myometrial Infiltrative bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection. JOURNAL OF MINIMALLY INVASIVE UROLOGY,2017,6(4): 230-234.  
Doi:10.19558/j.cnki.10-1020/r.2017.04.010
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双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤复发情况及其与癌组织VEGF、Survivin表达水平的关系
李碧锦1, 李军1, 凌凯南1, 季志强1
1广西壮族自治区江滨医院泌尿外科 530021 南宁
通信作者:李碧锦,13907869384@139.com
收稿日期: 2017-04-07
摘要

目的: 探讨双极等离子切除术治疗高龄高危肌层浸润性膀胱肿瘤复发情况及其与癌组织血管内皮生长因子(VEGF)、生存素(Survivin)表达水平的关系。方法: 选取2012年9月~2016年9月收治的高龄高危肌层浸润性膀胱肿瘤患者100例,行双极等离子切除术治疗并随访至少半年。采用免疫组化法检测患者癌组织VEGF、Survivin表达水平并统计患者随访期间膀胱肿瘤复发情况。比较复发和无复发患者癌组织VEGF、Survivin表达水平,分析其与癌组织VEGF、Survivin表达水平复发的关系及其对复发的预测价值。结果: 100例高龄高危膀胱肿瘤患者随访期间复发率为16.00%。与无复发患者比较,复发患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率均较高( P<0.05)。Spearman无条件相关分析结果显示,高龄高危膀胱肿瘤行双极等离子切除术治疗患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率与其复发率均呈正相关( r=0.844, 0.879, P<0.05)。进一步诊断性试验分析结果显示,高龄高危膀胱肿瘤行双极等离子切除术治疗患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值良好,其中以两者联合预测患者复发的价值最优。结论: 双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤复发率较高,与其癌组织VEGF、Survivin表达水平密切相关,且与其癌组织VEGF、Survivin表达水平联合预测其复发的价值良好,因此,其癌组织VEGF、Survivin表达水平可能作为其复发评估的参考指标。

关键词: 双极等离子切除术; 高龄; 高危; 膀胱肿瘤; 复发; 血管内皮生长因子; 生存素; 关系
中图分类号:R737.14 文献标志码:A
Relationship between cancer tissue VEGF and Survivin expression with the recurrence of elderly patientswith myometrial Infiltrative bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection
Li Bijin1, Li Jun1, Ling Kainan1, Ji Zhiqiang1
1Department of Urology, the Guangxi Zhuang Autonomous Region Jiangbin Hospital, Nanning 530021, China
Corresponding author: Li Bijin, 13907869384@139.com
Abstract

Objective: To investigate the relationship between cancer tissue vascular endothelial growth factor (VEGF) and Survivin expression with the recurrence of elderly patients with myometrial Infiltrative bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection.Methods: 100 cases of elderly patients with myometrial Infiltrative bladder cancer in our hospital from September 2012 to September 2016 were treated with bipolar plasmakinetic resection and followed up for at least half of a year. Immunohistochemical method was applied to detect the VEGF and Survivin expression in cancer tissue of the patients and the recurrence of bladder tumor was observed. VEGF and Survivin expression in cancer tissues of patients with or without bladder tumor recurrence was compared, and relationship between VEGF and Survivin expression in cancer tissues with recurrence was analyzed.Results: The recurrence rate of 100 cases of elderly patients with high-risk bladder tumor was 16%. As compared with the patients without recurrence, VEGF and Survivin positive expression rate in cancer tissues of the patients with recurrent cancer was significantly increased ( P<0.05). Spearman unconditional correlation analysis showed that cancer tissue VEGF and Survivin positive expression rate and the recurrence rate of patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection showed a positive correlation ( r=0.844, 0.879, P<0.05). Further diagnostic test analysis showed that value of cancer tissue VEGF and Survivin positive expression rate predicting the recurrence of patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection was excellent, in which the value of combination of 2 factors predicting the recurrence was the best.Conclusions: Recurrence rate in patients with advanced bladder cancer treated with bipolar plasmakinetic resection is high and related to the cancer tissue VEGF and Survivin expression, and the value of cancer tissue VEGF and Survivin expression in combination predicting the recurrence was excellent, therefore, the cancer tissue VEGF and Survivin expression may be reference index for the assessment of the cancer recurrence of the patients.

Keyword: bipolar plasmakinetic resection; elderly; high risk; bladder neoplasms; recurrence; vascular endothelial growth factor; Survivin; relationship

膀胱癌的临床发生率较高, 好发于高龄人群, 可严重影响膀胱正常功能, 严重者甚至引发死亡等不良预后情况[1]。因此, 对膀胱癌进行及时有效的治疗十分重要。双极等离子切除术是治疗膀胱癌的重要方法, 其在膀胱癌治疗中的应用效果已得到多个研究的肯定[2, 3]。然而膀胱癌术后极易发生复发, 影响疗效和预后[4]。对膀胱癌术后复发进行早期评估干预, 减少复发及其相关不良影响的发生具有重要意义。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、生存素(Survivin)均是与癌症密切相关的因子, 且其与膀胱癌的关系已得到多个研究的认可[5, 6]。VEGF、Survivin亦可能与膀胱癌术后复发相关。因此, 我们检测了双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤的癌组织VEGF、Survivin表达情况, 并分析了其与复发的关系及其预测术后复发的价值, 旨在通过癌组织VEGF、Survivin表达检测, 达到早期预知双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤后复发风险, 及时采取干预措施减少复发的发生, 改善疗效和预后, 具体研究方法和结果报告如下。

1 资料与方法
1.1 临床资料

纳入标准:患者均出现血尿、尿频、尿急、尿痛, 经术前B超、CT、膀胱镜及诊断性电切病例检查确诊为乳头状尿路上皮膀胱肿瘤, 肿瘤侵犯超过黏膜层, T2期以上肿瘤, 无远处转移, 年龄60岁以上, 临床评估手术耐受并同一手术治疗; 排除标准:排除合并严重心肺功能不全或肝肾功能障碍、凝血异常、其他泌尿系统疾病、肿瘤侵犯输尿管口等患者。选取2012年9月~2016年9月收治的高龄高危膀胱肿瘤患者100例, 患者均符合纳入标准, 其中男62例, 女38例, 年龄62~81岁, 平均(68.58± 6.25)岁。最大肿瘤直径1.9~4.8 cm, 平均(3.35± 1.16)cm。肿瘤位于膀胱三角区31例, 位于两侧壁66例, 膀胱颈部3例。合并高血压16例, 合并糖尿病11例, 合并冠心病6例。试验符合伦理学标准, 经本院伦理学委员会审核批准, 且患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 手术方法

患者均行双极等离子切除术治疗:术前常规进行禁食禁水, 取膀胱截石位, 在全麻或硬膜外麻醉下完成手术。手术采用珠海司迈等离子双极电切系统, 手术采用膀胱截石位, 内镜24号, 外鞘27号, 电切、电凝功率分别为140 W和80 W, 以生理盐水为工作介质, 经尿道缓慢轻柔地插入电切镜, 监控下将电切镜推至膀胱, 观察膀胱情况、输尿管口情况, 确定肿瘤的具体位置、数目、大小等, 对于较小的合并带蒂肿瘤从根部横断切除, 较大肿瘤由冠部向根部逐层切除直至根部, 切除范围均为肿瘤外膀胱组织2 cm, 多发肿瘤的切除顺序为先小后大, 冲洗器将组织碎片洗出并取出一部分送至本院病理科行病理检查, 电凝止血, 观察无出血后退出电切镜, 留置F20导尿管导尿5~7 d。治疗后患者均接受门诊随访, 每3个月1次, 主要观察患者临床症状和复发情况, 随访截止日期为2017年1月15日, 期间无患者失访, 随访率100%(100/100)。对于随访期间复发患者再次行双极等离子切除术治疗, 操作同上。

1.3 观察指标和检测方法

采用免疫组化法检测患者癌组织VEGF、Survivin表达水平, 将切除所得肿瘤组织进行石蜡包埋处理, 采用切片机制成4 μ m后的连续切片并制成载玻片, 常规进行脱蜡及梯度酒精水化处理, 并采用柠檬酸微波抗原热修复、双氧水去氧化酶活性, 滴加相应抗体后在20℃恒温箱中孵育过夜, VEGF、Survivin相关抗体均由北京中杉金桥生物技术有限公司提供, 以试剂公司提供的阳性切片为阳性对照; 孵育后行DAB显色, 高倍显微镜下观察显色满意后行流水冲洗、苏木精复染, 梯度酒精脱水, 二甲苯透明, 中性树胶封片等待观察。随机选取3个高倍视野, 观察染色的范围及着色程度, 根据染色强度(无阳性着色、弱、中、强染色)及阳性细胞百分数(0、1%~25%、26%~49%、50%~100%)分别计分为0、1、2和3分, 两项评分之和为最终结果, 其中0~2分为阴性, 3~6分为阳性[7], VEGF染色定位于细胞质中, Survivin染色定位于细胞质、 细胞核中, 以黄色或棕黄色染色为炎性。并统计患者随访期间膀胱肿瘤复发情况。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件, 计数资料以率的形式表示并采用卡方检验进行组间比较, 采用Spearman无条件相关分析法分析高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率与其复发率的关系, 采用诊断性试验四格表分析高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值, 以P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1 双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤的手术情况和复发情况分析

双极等离子切除术手术时间23~66 min, 平均(36.62± 13.55)min, 术中、术后无明显出血, 所有患者均一次性顺利完成手术切除, 术后住院6~10 d, 平均(7.26± 1.55)d, 术后无明显并发症发生。

100例患者随访期间出现复发患者16例, 无复发患者84例, 随访期间复发率为16.00%(16/100)。

2.2 复发和无复发患者癌组织VEGF、Survivin表达水平比较

与无复发患者比较, 复发患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率均较高, 差异有统计学意义(P< 0.05), 详见表1、图1和图2。

表1 复发和无复发患者癌组织VEGF、Survivin表达水平比较

图1 膀胱肿瘤组织VEGF表达(400× )

图2 膀胱肿瘤组织Survivin表达(200× )

2.3 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平与其复发率的关系分析

Spearman无条件相关分析结果显示, 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率与其复发率均呈正相关。(r=0.844, 0.879, P< 0.05)。

2.4 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值

进一步诊断性试验分析结果显示, 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值良好, 其中以两者联合预测患者复发的价值最优, 详见表2。

表2 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值
3 讨论

近年来各类泌尿系统恶性肿瘤的发生不断增加。膀胱癌是泌尿系统常见恶性肿瘤, 多数为局限于黏膜和固有层的浅表性肿瘤, 即非肌肉浸润性肿瘤, 常行手术治疗[8]。双极等离子切除术是治疗膀胱癌的重要方法, 可快速有效切除病灶, 缓解患者的临床症状, 且手术操作的创伤较小, 术后恢复快, 疗效佳[9]。而膀胱肿瘤发生高龄患者可

由于其自身身体机能减退, 免疫力较差, 术后恢复缓慢等疗效欠佳[10]。且膀胱肿瘤切除术后复发较多, 临床复发率高, 需再次进行治疗, 增加患者痛楚和经济负担, 甚至引发死亡等的发生, 严重影响患者健康状况和预后情况[11, 12]。本研究亦关注了高龄高危膀胱肿瘤双极等离子切除术后复发情况, 本研究结果显示, 其术后复发率高达16.00%, 其复发率较高, 对患者健康和生命安全威胁较大, 急需改善。因此, 对膀胱肿瘤双极等离子切除术后复发进行早期评估干预从而预防其发生, 减少其带来的不良影响对改善其患者的健康水平和预后均具有重要意义。

肿瘤的发生发展涉及多个因子, 其中VEGF是与肿瘤肿瘤血管形成密切相关的因子, 是肿瘤血管形成刺激因子, 可通过与其受体结合而诱导受体的磷酸化从而促进肿瘤血管形成, 而肿瘤血管的生成可促进肿瘤生长, 加重癌症病情, 甚至影响预后[13, 14]。因此, VEGF可能与高龄高危膀胱肿瘤双极等离子切除术后复发相关。生存素(Survivin)亦是与癌症密切相关的因子, 作为目前发现的作用最强的凋亡抑制基因, Survivin广泛表达于各类肿瘤环境, 可通过抑制终末效应因子Caspace 7和Caspace 3及干扰Caspace 9活性达到抑制肿瘤凋亡的目的, 与肿瘤的生物学行为、分化、临床分期、淋巴结转移等均密切相关, 甚至有研究证实其与肿瘤新生血管的生成相关, 且其与膀胱癌的关系已得到多个研究的认可[15, 16]。因此, Survivin亦可能与膀胱癌术后复发相关。然而目前关于VEGF、Survivin表达与高龄高危膀胱肿瘤术后复发的具体关系尚不明确, 需进一步研究证实。

因此, 本研究采用双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤, 观察了其治疗后复发情况和癌组织VEGF、Survivin表达情况, 并分析了癌组织VEGF、Survivin表达与复发的关系及其预测术后复发的价值。本研究结果显示, 高龄高危膀胱恶性肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin阳性表达率均较高, 提示VEGF、Survivin可能与高龄高危膀胱癌相关。且本研究中双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤术后出现复发患者癌组织VEGF、Survivin表达水平明显较高, 提示其组织VEGF、Survivin表达与其术后复发可能相关。进一步的Spearman无条件相关分析结果显示, 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平与其复发率均呈正相关, 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平可反映去复发风险, 可能用于其复发的预测。进一步诊断性试验分析结果显示, 高龄高危膀胱肿瘤患者癌组织VEGF、Survivin表达水平预测其复发的价值良好, 其中以两者联合预测患者复发的价值最优。联合检测癌组织VEGF、Survivin表达可达到早期预知双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤后复发风险, 而及时采取干预措施减少复发的发生有助于改善疗效和预后, 并减少复发后治疗支出, 研究成果应用于临床的经济效益亦较好, 且癌组织VEGF、Survivin表达检测操作简单, 易于掌握, 取材容易, 可在各医院推广应用, 临床应用前景良好。

综上所述, 双极等离子切除术治疗高龄高危膀胱肿瘤复发率较高且与其癌组织VEGF、Survivin表达水平密切相关, 联合检测其癌组织VEGF、Survivin表达水平可预测其复发风险, 指导临床早期干预, 以期改善疗效和预后。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Ceylan GG, Önalan EE, Kuloğlu T, et al. Potential role of melastatin-related transient receptor potential cation channel subfamily M gene expression in the pathogenesis of urinary bladder cancer. Oncol Lett, 2016, 12(6): 5235-5239. [本文引用:1]
[2] 王军, 武晨琳, 张建功, 等. 等离子双极电切术治疗高龄、高危浸润性膀胱尿路上皮癌患者的效果观察. 肿瘤研究与临床, 2014, 26(10): 683-685, 688. [本文引用:1]
[3] 何兆飞, 张君俊, 施东辉, 等. 经尿道等离子电切联合吡柔比星膀胱灌注治疗高龄高危非肌层浸润性膀胱癌. 国际泌尿系统杂志, 2013, 33(4): 453-455. [本文引用:1]
[4] Farhan M, Nazim SM, Ahmed J, et al. Frequency and predictors of recurrence of bladder tumour on first check cystoscopy-a tertiary care hospital experience. J Pak Med Assoc, 2016, 66(Suppl 3)(10): S125-S130. [本文引用:1]
[5] 费夏玮, 刘光香, 祝帅, 等. p53、VEGF、COX-2和EGFR在膀胱癌组织中表达的相关性及临床意义. 现代泌尿外科杂志, 2013, 18(3): 249-253. [本文引用:1]
[6] 闫拥军, 任选义, 江海波, 等. 存活素和血管内皮生长因子在膀胱癌组织的表达及其意义. 中华实验外科杂志, 2016, 33(6): 1451-1453. [本文引用:1]
[7] 周行, 罗琼, 张文先, 等. Survivin、VEGF 在年轻宫颈癌中的表达及意义. 四川医学, 2014, 35(7): 800-802. [本文引用:1]
[8] Anghel RM, Gales LN, Trifanescu OG. Outcome of urinary bladder cancer after combined therapies. J Med Life, 2016, 9(1): 95-100. [本文引用:1]
[9] 张国飞, 吴越, 汪清, 等. 短周期多次经尿道深度电切联合膀胱灌注化疗治疗高龄T2期高危浸润性膀胱癌45例. 中国微创外科杂志, 2014, 14(8): 711-712, 728. [本文引用:1]
[10] 肖友平, 范凯, 黄从军, 等. 经尿道膀胱癌等离子电切术联合吡柔比星治疗高龄高危非肌层浸润性膀胱癌的临床疗效. 中国老年学杂志, 2014, 11(16): 4670-4671. [本文引用:1]
[11] Long X, Zu X, Li Y, et al. Epidermal Growth Factor Receptor and Ki-67 as Predictive Biomarkers Identify Patients Who Will Be More Sensitive to Intravesical Instillations for the Prevention of Bladder Cancer Recurrence after Radical Nephroureterectomy. PLoS One, 2016, 11(11): e0166884. [本文引用:1]
[12] Duan W, Du L, Jiang X, et al. Identification of a serum circulating lncRNA panel for the diagnosis and recurrence prediction of bladder cancer. Oncotarget, 2016, 7(48): 78850-78858. [本文引用:1]
[13] 周强, 张华勇. HER-2蛋白、VEGF在胃癌组织中的表达及相互关系. 川北医学院学报, 2016, 31(5): 690-692. [本文引用:1]
[14] Ou M, Sun X, Liang J, et al. A polysaccharide from Sargassum thunbergii inhibits angiogenesis via downregulating MMP-2 activity and VEGF/HIF-1α signaling. Int J Biol Macromol, 2016, 94(Pt A): 451-458. [本文引用:1]
[15] Kunze D, Erdmann K, Froehner M, et al. Enhanced inhibition of bladder cancer cell growth by simultaneous knockdown of antiapoptotic Bcl-xL and survivin in combination with chemotherapy. Int J Mol Sci, 2013, 14(6): 12297-12312. [本文引用:1]
[16] 余大海, 王超奇, 王明, 等. Survivin、Caspase-3在膀胱癌中的表达及预后意义. 现代肿瘤医学, 2013, 21(8): 1837-1839. [本文引用:1]